一锅端丨质粒到mRNA原液，一气呵成！
发布时间：2023-03-04
mRNA疫苗/药物是将编码疾病特异性抗原的mRNA通过递送系统引入体内，利用宿主细胞的蛋白质合成机制产生抗原，让细胞成为了蛋白药物生产的小型工厂，从而触发机体免疫应答！mRNA技术的开发难点和关键技术点在于合成修饰及递送系统。目前，针对mRNA的规模化生产，较为高效的方式为体外转录（IVT），IVT工艺是整个mRNA原液生产流程中最核心的步骤。
mRNA原液制备过程：质粒DNA线性化与纯化→体外转录（共转录加帽）→纯化→mRNA原液。IVT主要是以线性DNA为模板制备mRNA，体外转录所用质粒DNA的质量、转录和修饰工艺优化、反应过程控制，都对最终mRNA原液质量至关重要。针对mRNA体外转录步骤，申基生物简化工艺流程，特推出One-pot mRNA Co-transcription Kit（一锅法mRNA共转录试剂盒），可实现环状质粒到mRNA原液一步到位！
产品描述
One-pot mRNA Co-transcription Kit（一锅法mRNA共转录试剂盒，货号：10113-10201（BspQ I）、10113-10202（Bsa I）、10113-10203（Xba I）、10113-10204（Xho I））对mRNA共转录工艺进行了优化，本试剂盒以环状质粒为起始模板，以线性化酶、聚合酶、核苷酸/修饰性核苷酸、帽类似物为原料，可一锅法直接获得mRNA，省去了线性化质粒的纯化步骤，1μg的环状质粒可以产生150-200μg的RNA。
产品组分
产品优势
1、步骤简化，环状质粒到mRNA原液一步到位；
2、避免纯化带来的损耗，降低成本；
3、缩短工艺时间，且高mRNA得率
实验数据
本试剂盒使用Fluc-eGFP plasmid质粒模板（mRNA产物长度~2.5K）进行体外转录，1μg的环状质粒可以产生150-200μg的RNA，且完整性大于90%，加帽率大于95%！
mRNA
完整性检测
申基生物使用Q-sep100检测mRNA产物完整性，完整性为93.0%！
图1 mRNA完整性检测峰图
mRNA加帽率检测
申基LC-MS平台检测mRNA产物加帽率，加帽率为98.2%！
图2A：mRNA加帽率检测色谱图 图2B：mRNA加帽率检测质谱图
mRNA尾长检测
申基LC-MS平台进行mRNA产物尾长检测，检测显示Poly A尾长呈正态分布，符合预期！
图3A：mRNA尾长检测色谱图 图3B：mRNA尾长检测质谱图
mRNA活性检测
本试剂盒共转录加帽的mRNA产物转染细胞24h后，可在细胞内进行高表达！
图4 mRNA产物细胞活性检测
相关新闻
申基生物
官方公众号
申基生物
官方销售客服
苏公网安备 32011302321389号
